培养细胞生长减慢和死亡的原因
点击次数:452 更新时间:2022-11-02
培养细胞生长减慢这种情况可能的原因包括:
1.由于更换了不同培养液或血清,细胞需要重新适应。
2.试剂保存不当,培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨/酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏。
3.培养物中有少量细菌或真菌污染。
4.接种细胞起始浓度太低。
5.细胞已老化。
6.支原体污染。
建议解决方法:
1.比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清支持细胞生长实验。让细胞逐渐适应新培养液。
2换入新鲜配制培养液,或补加谷氨/酰胺及生长因子。
3.用无抗生素培养液培养,如发现污染,更换培养物。
4.培养液需在2-8℃避光保存。含血清完/全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完。
5.增加接种细胞起始浓度。
6.换用新的保种细胞。
7.隔离培养物,检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染,更换新的培养物。
培养细胞死亡的原因:
常见的可能原因是细胞传代时,消化过度,细胞严重受伤。如经验不足,细胞传代消化时,在显微镜下观察,至细胞变圆、脱壁,加入含血清的培养液,终止消化。其他原因包括长途运输,细胞在不适宜的温度下时间过长;培养液中营养成分消耗殆尽,没有及时换液。如果原来细胞状态较好,换液后细胞死亡,应考虑是培养液及血清的质量。-好事先已证明培养液及血清质量良好。