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关于标准绵羊血清的五大问题
点击次数:1559 更新时间:2015-10-09
 问题一:如何保管标准绵羊血清
  对于准绵羊血清的保存,小编建议长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中,4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月,由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
  问题二:如何解冻标准绵羊血清
  标准绵羊血清需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
  问题三:如何处置血清冻结后的絮状沉积物
  当血清冻结后出现了絮状沉积物,我们应该仔细分析出现这种现象的原因,一般来说,zui通常的原因就是血清中脂蛋白的变性构成的,而血纤维蛋白(构成凝血的蛋白之一)在血清冻结后,也会存在于血清中,亦是构成血清沉积物的主要缘由之一。想要去除血清冻结后的絮状沉积物,我们可以将血清分装至无菌离心管中,以400g略微离心,上清液即可接着参加培育基内一同过滤。
  问题四:如何防止絮状沉积物出现
  防止絮状沉积物出现的方法就是注重正确的血清冻结进程,并尽量防止灭活血清及长时刻的将血清置于高温环境中。
  问题五:为什么要做热灭活
  热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻的血清,加热过程中须规则摇晃均匀,此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活,除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多。
  试验显现,通过正确处置的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需求的。通过处置的血清对细胞成长只要细小的推进,或*没有任何效果,乃至一般由于高温处置影响了血清的质量,而构成细胞成长速率的下降。而通过热处置的血清,沉积物的构成会明显的增多,这些沉积物在倒置显微镜下调查,像是“小黑点”,常?;崛醚刑终呶笠晕茄逶馐芪廴?,而把标准绵羊血清放在3 7℃环境中,又会使此沉积物更增多,使研讨者认为是微生物的割裂扩增。
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